Hypersep固相萃取的操作步驟

更新時(shí)間：2023-02-14

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　　Hypersep固相萃取是近年發(fā)展起來的一種樣品預(yù)處理技術(shù)，由液固萃取和柱液相色譜技術(shù)相結(jié)合發(fā)展而來，主要用于樣品的分離、純化和濃縮，與傳統(tǒng)的液液萃取法相比較可以提高分析物的回收率，更有效的將分析物與干擾組分分離，減少樣品預(yù)處理過程，操作簡單、省時(shí)、省力。

　　操作步驟：

　　1、固相萃取柱的預(yù)處理活化：

　　用適當(dāng)?shù)娜芤簩滔噍腿≈M(jìn)行預(yù)處理活化，可以展開碳?xì)滏?，增加和目?biāo)分析物作用的表面積，可以除去柱上吸附的對分析有影響的雜質(zhì)，保證良好的萃取再現(xiàn)性，同時(shí)注意在上樣前預(yù)處理好的固相柱必須保持濕潤。

　　2、固相萃取柱的上樣：

　　將樣品加于固相萃取柱中，用正壓或負(fù)壓使樣品通過柱子，控制好樣品的流速，對于生物樣品，一般控制在1、5 ml/min。對于以離子交換為作用機(jī)理的萃取，樣品通過固相萃取柱的速度應(yīng)該適當(dāng)?shù)慕档?，以保證分析物有足夠的時(shí)間與SPE柱填料的離子交換功能團(tuán)發(fā)生充分的作用。

　　3、固相萃取柱的淋洗：

　　用適當(dāng)?shù)那逑慈軇┻x擇性地洗掉附著力弱的雜質(zhì)而保留目標(biāo)分析物于固相萃取柱上。清洗溶劑的選擇取決于最后的分析手段。

　　4、固相萃取柱的干燥：

　　如最后的清洗溶劑為緩沖溶液或水溶性有機(jī)溶劑，而分析手段為反相HPLC，固相柱上的殘留水對分析影響不大。但是，當(dāng)洗脫劑為非水溶性有機(jī)溶劑或分析手段又為GC或GC-MS

　　時(shí)，固相柱的干燥就顯得特別重要。

　　5、目標(biāo)分析物的洗脫：

　　選擇洗脫溶劑時(shí)必須考慮有足夠強(qiáng)度的洗脫劑，要以最小用量的洗脫劑將盡可能多的目標(biāo)分析物洗脫下來；同時(shí)還要兼顧洗脫劑必須有足夠的選擇性，選擇只將目標(biāo)分析物洗脫，而吸附力強(qiáng)的雜質(zhì)保留在柱上。

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